GB/T 14233.2-2005《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 第 2 部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法》 中第 3 章無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)定了無(wú)菌醫(yī)療器械微生物污染檢測(cè)的通用方法，適用于無(wú)菌口罩（包括醫(yī)用外科口罩、醫(yī)用防護(hù)口罩等滅菌型口罩）的微生物含量檢測(cè)，用于驗(yàn)證口罩是否符合無(wú)菌要求。

試驗(yàn)基本要素

1. 試驗(yàn)?zāi)康?/h3>

將無(wú)菌口罩或其浸提液接種于培養(yǎng)基內(nèi)，檢驗(yàn)供試品是否存在細(xì)菌和真菌污染，確認(rèn)口罩滅菌效果符合要求。

2. 適用范圍

適用于滅菌型口罩的無(wú)菌性檢測(cè)，非滅菌型口罩通常采用 GB 15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品》附錄 B 中的微生物限度檢測(cè)方法。

3. 試劑與設(shè)備

試驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 器具滅菌

• 壓力蒸汽滅菌：121°C，30 分鐘

• 干熱滅菌：160°C，2 小時(shí)

2. 無(wú)菌室驗(yàn)證

• 消毒后檢查：3 只直徑 90mm 培養(yǎng)皿，倒?fàn)I養(yǎng)瓊脂，30-35°C 培養(yǎng) 48h 無(wú)菌后，在操作臺(tái)暴露 30 分鐘，培養(yǎng)后平均菌落數(shù)≤1 個(gè)

• 試驗(yàn)過(guò)程中同步監(jiān)測(cè)空氣質(zhì)量

3. 方法驗(yàn)證（關(guān)鍵步驟）

對(duì)未知或可疑的口罩樣品，需按《中國(guó)藥典》無(wú)菌檢查法規(guī)定進(jìn)行抑菌性驗(yàn)證試驗(yàn)，確認(rèn)供試品無(wú)抑菌活性或可忽略不計(jì)，避免假陰性結(jié)果。

試驗(yàn)操作流程

1. 供試品數(shù)量

同一批號(hào)3-11 個(gè)單位供試品，根據(jù)口罩規(guī)格和檢驗(yàn)需求調(diào)整。

2. 浸提介質(zhì)選擇

優(yōu)先使用9g/L 無(wú)菌氯化鈉溶液，也可選擇符合《中國(guó)藥典》要求的其他稀釋液和沖洗液。

3. 供試液制備（核心步驟）

基本原則：優(yōu)先采用將口罩或其有代表性各部分（如內(nèi)層、外層、熔噴層）直接投放入培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。若口罩結(jié)構(gòu)復(fù)雜不適宜直接投放，按以下方法制備：

無(wú)菌操作，制備后 2 小時(shí)內(nèi)使用

按口罩表面積計(jì)算：每 10cm2 加入 1mL 浸提介質(zhì)

充分振搖，確保浸提介質(zhì)完全洗滌口罩表面

特殊情況可采用薄膜過(guò)濾法處理樣品

4. 接種與培養(yǎng)

接種方式：按《中國(guó)藥典》無(wú)菌檢查法規(guī)定選擇，可采用直接接種或薄膜過(guò)濾法

培養(yǎng)條件：

• 需氧菌、厭氧菌：30-35°C，培養(yǎng) 14 天

• 真菌：20-25°C，培養(yǎng) 14 天

  觀察頻率：每日觀察，記錄培養(yǎng)基渾濁度、菌落生長(zhǎng)情況等

5. 結(jié)果判定

• 若所有培養(yǎng)基均澄清透明，無(wú)微生物生長(zhǎng)，判定為無(wú)菌

• 若任一培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁或菌落生長(zhǎng)，需進(jìn)一步鏡檢和微生物鑒定，確認(rèn)污染類(lèi)型

試驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容

供試品名稱(chēng)、規(guī)格型號(hào)、生產(chǎn)批號(hào)、滅菌批號(hào)

供試液制備方法（直接投放 / 浸提法 / 薄膜過(guò)濾法）

接種方式、培養(yǎng)基種類(lèi)、培養(yǎng)條件

每日觀察結(jié)果記錄

最終判定結(jié)論（無(wú)菌 / 污染）及污染微生物種類(lèi)（如有）

關(guān)鍵注意事項(xiàng)

無(wú)菌操作：全過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌，防止外源性污染

樣品代表性：需檢測(cè)口罩關(guān)鍵部位（如與口鼻接觸區(qū)域、呼吸閥等）

培養(yǎng)時(shí)間：不得少于 14 天，確保慢生長(zhǎng)微生物充分繁殖

結(jié)果復(fù)核：出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，需重新取樣檢測(cè)并進(jìn)行微生物鑒定，排除試驗(yàn)操作污染

與其他標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)聯(lián)

無(wú)菌口罩微生物指標(biāo)判定依據(jù)：YY/T 0969-2013《一次性使用醫(yī)用口罩》、**GB 19083-2010《醫(yī)用防護(hù)口罩技術(shù)要求》** 等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

無(wú)菌檢查法細(xì)節(jié)參照：《中國(guó)藥典》（現(xiàn)行版）附錄無(wú)菌檢查法規(guī)定

新版標(biāo)準(zhǔn)變化：GB/T 14233.2-2025 已刪除無(wú)菌試驗(yàn)和細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)，增加浸提液制備，無(wú)菌口罩檢測(cè)仍可參考 2005 版執(zhí)行