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植物乳桿菌噴霧干燥制備技術(shù)詳解及案例剖析

返回列表 瀏覽:236 日期:2020-04-18

在益生菌家族中,植物乳桿菌是一類分布廣泛、功能多樣的革蘭氏陽(yáng)性菌,隸屬于乳酸菌科乳酸菌屬,為圓端直桿菌,通常單生或成鏈存在,最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,厭氧或兼性厭氧,在自然環(huán)境中尤其是發(fā)酵食品中較為常見。作為同型發(fā)酵乳酸菌,其產(chǎn)酸能力較強(qiáng),能產(chǎn)生85%以上的乳酸,同時(shí)還具備抗癌、抗炎、抗肥胖和抗糖尿病等多種有益特性,可有效抵御胃酸環(huán)境,順利通過口腔、腸道直至結(jié)腸,抑制有害細(xì)菌生長(zhǎng),調(diào)節(jié)腸道菌群平衡。這些獨(dú)特的生物學(xué)特性,讓植物乳桿菌在多個(gè)行業(yè)中獲得了廣泛應(yīng)用。

在食品行業(yè),植物乳桿菌是發(fā)酵食品的核心菌株之一,廣泛用于酸奶、酸菜、青貯飼料、肉制品等的生產(chǎn),既能提升食品風(fēng)味,又能延長(zhǎng)貨架期,還可增強(qiáng)食品的抗氧化和抗菌活性。例如在黃酒釀造中,接種特定植物乳桿菌菌株可顯著降低浸米水和黃酒中的生物胺含量,減少宿醉風(fēng)險(xiǎn),且不影響黃酒風(fēng)味。在保健品行業(yè),其益生菌特性被充分利用,用于制備調(diào)節(jié)腸道菌群、改善腸道紊亂、增強(qiáng)免疫力的益生菌制劑。養(yǎng)殖行業(yè)中,植物乳桿菌能穩(wěn)定水體pH值,降解重金屬,抑制養(yǎng)殖水體底部糞便和殘餌腐爛,降低氨氮和亞硝酸鹽含量,減少化工降解劑使用,降低養(yǎng)殖成本。此外,在醫(yī)療領(lǐng)域,植物乳桿菌也展現(xiàn)出良好潛力,可用于開發(fā)具有抗菌、抗炎活性的制劑,甚至在促進(jìn)骨骼發(fā)育、保護(hù)腸道屏障等方面的應(yīng)用也在深入研究中。

為實(shí)現(xiàn)植物乳桿菌的規(guī)模化應(yīng)用,高效的制備技術(shù)至關(guān)重要。噴霧干燥技術(shù)因具有成本低、效率高、易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢(shì),成為植物乳桿菌粉劑制備的主流技術(shù)之一。以下為植物乳桿菌的噴霧干燥機(jī)制備實(shí)例,展現(xiàn)了不同工藝條件下的技術(shù)要點(diǎn)與應(yīng)用效果。

第一個(gè)案例以植物乳桿菌NCU116為研究對(duì)象,致力于優(yōu)化噴霧干燥工藝以制備高活性菌劑。某公司通過正交試驗(yàn)確定了最佳復(fù)配保護(hù)劑配方:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的脫脂乳、5%的海藻糖與3%的谷氨酸鈉,該保護(hù)劑能顯著降低噴霧干燥過程對(duì)菌體細(xì)胞膜的損傷。隨后通過響應(yīng)面分析得到最優(yōu)噴霧干燥條件:進(jìn)風(fēng)溫度125℃,物料流量320mL/h,此時(shí)菌懸液初始菌含量為10.25lg CFU/mL,干燥后菌劑存活率達(dá)到89.95%,活菌數(shù)高達(dá)10.96lg CFU/g。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示,使用該保護(hù)劑后,細(xì)胞膜保持完整的菌體比例從無保護(hù)劑時(shí)的1.12%提升至49.75%。通過環(huán)境掃描電子顯微鏡觀察,干燥后的菌劑顆粒呈球形,表面雖有凹陷或褶皺但無裂紋,顆粒大小在10~18μm之間;差示掃描量熱法測(cè)得菌劑的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為79.50℃。存儲(chǔ)穩(wěn)定性測(cè)試表明,菌劑在-20℃條件下存儲(chǔ)60天后活菌數(shù)變化較小,而在25℃存儲(chǔ)60天,活菌數(shù)下降2.31個(gè)對(duì)數(shù)值,為菌劑的存儲(chǔ)條件選擇提供了重要依據(jù)。

第二個(gè)案例聚焦于植物乳桿菌微囊化制劑的制備,以提升菌株對(duì)胃腸道惡劣環(huán)境的耐受性。某公司采用氣流式噴霧干燥機(jī),以植物乳植桿菌YBT5為菌株,設(shè)計(jì)了大豆蛋白-藻酸鹽復(fù)合包埋體系。制備過程分為多個(gè)關(guān)鍵步驟:首先制備菌懸液,將凍存于-80℃的植物乳植桿菌YBT5以2%的接種量接種在MRS培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)24h,連續(xù)傳代兩代后,再于37℃培養(yǎng)18h活化;隨后以1500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘收獲菌體,用無菌0.1wt%蛋白胨水洗滌兩次,最后用pH=7.4的磷酸鹽緩沖鹽水稀釋至濃度為10?CFU/mL的菌懸液。之后將1wt%的菌懸液接種到pH=7.0的1wt%藻酸鹽和4wt%大豆蛋白水性混合物中,在室溫下以600rpm的轉(zhuǎn)速磁力攪拌30分鐘至均勻。噴霧干燥階段,將混合物以200rpm的低速攪拌注入噴嘴直徑為0.7mm的噴霧干燥噴嘴,設(shè)置吸氣器壓力90%,霧化器壓力600nL/h,物料流速5mL/min,獲得益生菌微粒。為進(jìn)一步提升包埋效果,將收集到的益生菌微粒引入3wt%的CaCl?水溶液中,室溫下以800rpm攪拌1小時(shí)進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng),制備得到交聯(lián)的大豆蛋白藻酸鹽微囊,微囊內(nèi)包封有植物乳桿菌YBT5。最后通過2300rpm離心5分鐘收集膠囊化益生菌,用無菌水洗滌三次后,于-20℃冷凍,再在7Pa、-50℃條件下凍干24小時(shí),得到植物乳植桿菌YBT5微囊化制劑。該制劑能有效保護(hù)菌株免受胃酸和膽汁鹽侵蝕,顯著提高生物利用度,且通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,該菌株能激活相關(guān)通路抑制破骨細(xì)胞分化,具有促進(jìn)骨骼發(fā)育的功能。

第三個(gè)案例創(chuàng)新性地引入芽孢殼液作為保護(hù)劑,制備高穩(wěn)定性的植物乳桿菌粉劑。某公司的制備流程如下:第一步,用無菌水重懸植物乳桿菌菌泥,得到均勻的菌懸液;第二步,向菌懸液中加入復(fù)合保護(hù)劑和枯草芽孢菌的芽孢殼液,其中芽孢殼液與植物乳桿菌菌泥的體積質(zhì)量比控制在1~2mL:2~1g,芽孢殼液的濃度為(9-10)×10?particles/mL;第三步,將混合液進(jìn)行震蕩培養(yǎng),使芽孢殼充分吸附并包裹在植物乳桿菌表面,形成保護(hù)層;第四步,將培養(yǎng)后的混合液送入離心式噴霧干燥機(jī)進(jìn)行干燥,通過芽孢殼形成的保護(hù)層,有效減少干燥過程中菌體的死亡,同時(shí)顯著提升最終粉劑產(chǎn)品的儲(chǔ)存穩(wěn)定性,解決了植物乳桿菌在常溫儲(chǔ)存過程中活菌數(shù)快速下降的難題。

以上案例表明,噴霧干燥技術(shù)制備植物乳桿菌的核心在于合理選擇保護(hù)劑配方與優(yōu)化工藝參數(shù),不同的技術(shù)方案可針對(duì)不同的應(yīng)用需求,實(shí)現(xiàn)菌株活性與儲(chǔ)存穩(wěn)定性的平衡。隨著研究的深入,越來越多的創(chuàng)新技術(shù)將應(yīng)用于植物乳桿菌的制備中,進(jìn)一步拓展其在各行業(yè)的應(yīng)用前景。

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